检测原理
本试剂采用竞争性胶体金免疫层析试验(GICA)原理制成,对于不同亚型的禽流感病毒抗体都有很好的敏感性。样本加入到加样孔后与AIV抗原、胶体金标记物一起沿层析膜移动,若样本中存在AIV抗体则与胶体金标记物竞争AIV抗原,使检测线不显示紫红色,若样本中不存在AIV抗体则产生颜色反应。
使用范围
本试剂用于检测禽类血清中禽流感病毒抗体,可用于免疫效果评价、辅助诊断等。
保存及稳定性
1.产品应置于2℃-30℃、干燥处保存,不得冷冻保存。
2.避免阳光直晒。
3.自生产日期起24个月内有效。
样本要求
血清:按常规方法抽取2-3ml血液置洁净干燥的试管中,静置约1h待血液凝固后于4000r/min离心10min(也可将血液静置约2h,待血液凝固自然析出血清),分离血清。要求血清清亮,无溶血、无污染。血清样本短期可于2-8℃保存,长期需置-20℃保存。
全血:可采用加抗凝剂的全血作为检测样本(全血样本不能冷冻)。
产品组成
1、试纸条:1条/袋×40袋(内含吸管)
2、说明书:1份
3、样本稀释液:40支
4、吸管:40个
测试步骤
1.撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
2.用配套吸管吸取已准备好的样本,垂直而缓慢的滴加1滴(约25μL)到加样孔内(此时观察孔内没有液体流出)。
3.等待10min后用装有缓冲液的滴瓶滴加两滴(约60μL)缓冲液到加样孔。
4.室温下放置10-15min判断结果,超过30min的结果无效。
注意: 过量加入样本或缓冲液会出现错误结果。
结果判定
1.阴性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。意味着抗体水平低于HI滴度1:16。
2.阳性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。意味着抗体水平等于或高于HI滴度1:32。
3.无效:在观察孔内,对照线区(C)不出现色线。
本试剂的检测阈值是HI试验1:32。所以通过对被检血清进行倍比稀释,找到其呈现阳性的最大稀释倍数,则可以得出抗体体滴度。例如:将待检血清用生理盐水分别做1:2(一份血清加一份生理盐水,往后依次类推)、1:4、1:8稀释,然后将3份不同稀释倍数样本分别进行检测,如1:2、1:4都呈阳性,而1:8呈阴性,则呈现阳性的最大稀释倍数为1:4,那么此份样本的最终抗体滴度为25(1:32)乘以22(1:4)等于27(1:128)。